使用Megazyme試劑盒,這幾點必須注意!
發(fā)布日期:2023-02-16 點擊:1203
淀粉是由葡萄糖分子聚合而成的高分子碳水化合物,不僅是人類主要的能量來源,在食品、化工、生物醫(yī)藥等行業(yè)也有著廣泛的應(yīng)用。
Megazyme試劑盒測定總淀粉含量與其他方法并無顯著性差異,因其酶解的唯一性使結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠,但試劑盒的使用有以下幾點注意事項:
1、Megazyme試劑盒中GOPOD溶液需避光保存,4℃下3個月或-10℃下12個月。若進行冷凍保存,需分裝在小規(guī)格棕色試劑瓶中,用1取1,避免反復(fù)凍融;此溶液新配置時為淺黃色,吸光度對照蒸餾水讀數(shù)時應(yīng)小于0.1,用該溶液孵育后的標(biāo)準(zhǔn)溶液F值應(yīng)符合85-115之間;
2、因試劑盒法的取樣量較小,若樣品不足以具有代表性導(dǎo)致的實驗結(jié)果偏離,可適當(dāng)增加樣品取樣量,每增加100mg樣品量,再加入α-Amylase溶液后相應(yīng)的微沸水浴孵育時間需增加約10min;但zui大樣品稱樣量不要超過500mg,500mg樣品量所對應(yīng)的微沸水浴孵育時間約需50min。
3、對于難分散樣品,可適當(dāng)再增加0.1-0.2mL乙醇溶液(80%v/v),以確保樣品分散均勻;
4、水浴微沸即可,培養(yǎng)管中樣品液體無需沸騰,剛放置進水浴的培養(yǎng)管會使水浴瞬時降溫,因此孵育時間可相應(yīng)延后2min左右。
淀粉含量測定的方法多種多樣以及各種化合物的檢測方法均不一,每種方法各有缺點和實用性,在實際應(yīng)用中,要根據(jù)樣品來源、結(jié)果準(zhǔn)確度要求、成本、操作的難易程度等多種因素來選擇測定方法,才能便于實驗開展,并提高數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性和可信度。